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- volume 9 (2005)
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Synthèses enzymatiques de néoglucoconjugués catalysées par l’alpha-glucosidase purifiée de la blatte Periplaneta americana (Linnaeus)
Notes de la rédaction
Reçu le 7 mai 2004, accepté le 23 décembre 2004
Résumé
La blatte Periplaneta americana (Linnaeus) possède dans son tube digestif une alpha-glucosidase mésophile (50 °C) ayant une activité hydrolytique maximale à pH 5,0. Cette enzyme, purifiée à homogénéité électrophorétique sur gel de polyacrylamide 12 % (P/V), hydrolyse activement le maltose, le saccharose et le p-nitrophényl-alpha-D-glucopyranoside. Nous avons testé l’aptitude de cette enzyme à catalyser les réactions de synthèse de néoglucoconjugués lorsque le maltose et le saccharose sont utilisés comme donneurs de glucosyle, le 2-phényléthanol et le phénol comme accepteurs de glucosyle (aglycones). Les conditions expérimentales ont été optimisées au niveau du temps de réaction, du pH et des concentrations de donneurs et d’accepteurs de glucosyle. Les pourcentages de réaction de transglucosylation [donnés par le rapport quantité de néoglucoconjugués synthétisés (mM)/quantité de produit d’hydrolyse (mM)] à 37 °C sont très élevés et ont pu atteindre 67 % et 48 % respectivement avec le 2-phényléthanol et le phénol comme accepteurs de glucosyle. Cette alpha-glucosidase hydrolyse les produits de synthèse lorsque les concentrations de ceux-ci deviennent importantes dans le milieu réactionnel. Ce qui signifie que ces produits sont le phényléthyl-alpha-D-glucoside et le phényl-alpha-D-glucoside. Ces résultats suggèrent que cette enzyme fonctionne par un mécanisme de rétention de configuration anomérique. À partir de ce constat, l’alpha-glucosidase de la blatte Periplaneta americana apparaît comme une bonne source pour la préparation des alpha-néoglucoconjugués.
Abstract
Enzymatic synthesis of neoglucoconjugates by purified alpha-glucosidase from cockroach Periplaneta americana (Linnaeus).
Cockroach Periplaneta americana (Linnaeus) contains in his digestive tract an acid (pH 5.0) and mesophile (50 °C) alpha-glucosidase. This enzyme, purified to homogeneity, hydrolyses highly maltose, sucrose and p-nitrophenyl-alpha-D-glucopyranoside. The ability of alpha-glucosidase from cockroach purified to homogeneity to catalyse transglucosylation reactions was tested using maltose and saccharose as glucosyl donors and 2-phenylethanol and phenol as acceptors. The experimental conditions were optimized in relation to the time course of the reaction, pH and concentrations of glucosyl donors and acceptors. The yields in transglucosylation reactions at 37 °C were very high and could attain 67% and 48% with 2-phenylethanol and phenol respectively as glucosyl acceptors. This alpha-glucosidase hydrolyzed the products formed. It seems that the products formed were the phenylethyl-alpha-D-glucoside and phenyl-alpha-D-glucoside. These results suggest that alpha-glucosidase from cockroach is an exoglucosidase which catalyse the splitting of the alpha-glucosyl residue from the non reducing terminal of the substrate to liberate alpha-glucose. This comportment indicates that this enzyme operated by a mechanism involving the retention of the anomeric configuration. On the basis of this work, alpha-glucosidase from P. americana appears to be a valuable tool for the preparation of alpha-neoglucoconjugates.